Edição do genoma com o sistema CRISPR Cas9

A engenharia do genoma est prestes a atingir a sua idade de ouro. Novas e excitantes ferramentas est o a surgir e a acumular-se no seu arsenal. Depois das TALENs e do Zing-finger, est a chegar uma nova ferramenta que vale a pena acrescentar. A mais recente adi o o sistema CRISPR. Um sistema que foi descoberto pela primeira vez no Streptococcus thermophilus e cujo papel natural a imunidade adaptativa espec fica da sequ ncia contra ADN estranho em bact rias. No presente relat rio, o sistema CRISPR Cas9, tipo II, utilizado numa tentativa de anular o gene HPRT1 expresso em linf citos como prova de conceito. O meio HAT em combina o com tioguanina utilizado como meio de sele o, permitindo um m todo de rastreio de leitura r pido e simples. Para verificar se o evento de edi o foi bem sucedido nas c lulas de mam feros, utilizado um kit de dete o de clivagem de ADN em combina o com um ensaio enzim tico.