Aplicação da tecnologia Microarray

A constru o de bibliotecas de cDNA til na compreens o da express o gen tica em organismos sob diferentes condi es, mas a sequ ncia aleat ria de cDNAs imparciais trabalhosa e d origem a redund ncia. O nosso objectivo era isolar os cDNAs induzidos pela mudan a de Aspergillus nidulans da glucose para polissac ridos seleccionados. Concebemos um m todo de Hibrida o de Subtrac o Negativa que envolveu o rastreio de uma biblioteca feita de cDNAs a partir de c lulas cultivadas sob uma condi o fisiol gica seleccionada com sondas de cDNA rotuladas a partir de outra condi o fisiol gica. Num ecr para transcri es induzidas pela mudan a da fonte de carbono, foram isolados 3.532 negativos. Foram feitas experi ncias de microarranjo de canal nico para confirmar que a maioria dos negativos foram de facto induzidos de forma diferente. Para obter informa es sobre a regula o, utiliz mos microarrays para identificar altera es de express o gen tica ap s uma mudan a de glucose para pectina ou inani o de glucose. Os resultados deste estudo retratam a utiliza o til da poderosa tecnologia dos microarrays para estudar o perfil de express o g nica sob v rias condi es fisiol gicas.