Technologies d'expression génique bactérienne

L'int gration al atoire du vecteur FIVE dans le chromosome de l'agent pathog ne est r alis e par mutagen se insertion-duplication afin de cr er un pool d'agents pathog nes recombinants (ce qui signifie que le g ne dans lequel le vecteur s'est ins r par recombinaison homologue n'est pas perturb ). Les recombinants peuvent tre s lectionn s l'aide de la r sistance aux antibiotiques, tant donn qu'un marqueur suppl mentaire se trouve galement sur la construction IVET int gr e. Les clones regroup s sont ensuite inocul s la souris. Les deux principaux types de strat gies de pi ge promoteur FIVETE sont (a) la compl mentation de la mutation auxotrophe et (b) l'expression de la r sistance aux antibiotiques. Seules les bact ries qui contiennent le marqueur s lectif fusionn un g ne transcriptionnellement actif dans l'h te sont capables de survivre. Apr s une p riode d'infection appropri e, les bact ries qui expriment le marqueur sont isol es du poumon, du foie, de la rate et du tissu m sent rique.