L'édition du génome avec le système CRISPR Cas9

L'ing nierie des g nomes est l'aube de son ge d'or. De nouveaux outils passionnants apparaissent et s'ajoutent son arsenal. Apr s les TALEN et les Zing-finger, un nouvel outil digne d'int r t vient s'ajouter. Il s'agit du syst me CRISPR. Ce syst me a t d couvert pour la premi re fois chez le Streptococcus thermophilus et son r le naturel est l'immunit adaptative sp cifique la s quence contre l'ADN tranger dans les bact ries. Dans le pr sent rapport, le syst me CRISPR Cas9, de type II, est utilis pour tenter d' liminer le g ne HPRT1 exprim dans les lymphocytes, titre de preuve de concept. Le milieu HAT combin la thioguanine est utilis comme milieu de s lection, ce qui permet une m thode de criblage rapide et simple. Pour v rifier que l' dition a bien eu lieu dans les cellules de mammif res, un kit de d tection du clivage de l'ADN est utilis en combinaison avec un test enzymatique.